Quelle technique de séparation pour quel composé ?

Les techniques de séparation ou de préparation de l’échantillon avant l’injection dans le détecteur les plus couramment utilisées sont :

1. La chromatographie en phase gazeuse (CG) : utilisée pour les constituants  gazeux et vaporisés, tels que les solvants, les produits de décomposition de plastiques, les pesticides, les hydrocarbures, les alcools, etc. En CG, les échantillons sont injectés dans la colonne chromatographique remplie de phases stationnaires sélectives et sont séparés en fonction de leurs différences de distribution entre la phase gazeuse et la phase stationnaire. Les composés séparés sont détectés à la sortie de la colonne et peuvent être identifiés et quantifiés en utilisant différents types de détecteurs (détecteurs de conductivité thermique, détecteurs de ionisation de flamme, détecteurs à spectrométrie de masse). La CG est une technique fiable et précise et est souvent utilisée pour les analyses environnementales, industrielles et médicales.
2. La chromatographie en phase liquide (ou CLHP) : utilisée pour les constituants liquides, tels que les médicaments, les produits alimentaires, les produits chimiques. En CLHP, les liquides sont injectés dans la colonne chromatographique remplie de phases stationnaires sélectives et sont séparés en fonction de leurs affinités chimiques avec la phase stationnaire. Les composés séparés sont détectés à la sortie de la colonne et peuvent être identifiés et quantifiés en utilisant différents types de détecteurs (détecteurs UV, détecteurs de fluorescence, détecteurs de conductivité). L'CLHP est une technique de séparation polyvalente et sensible, car elle permet la séparation de nombreux types de composés liquides avec une haute résolution et une grande précision.
3. La Chromatographie sur couche mince (CCM) : utilisée pour les constituants solides et les mélanges, tels que les produits végétaux, les produits pharmaceutiques, les produits alimentaires, etc. En CCM, les composés sont déposés sur une surface de silice ou de résines chargées, qui agissent comme la phase stationnaire. La phase mobile, souvent un solvant ou un mélange de solvants, est entraînée à travers la phase stationnaire par capillarité. Cela permet la séparation des composés en fonction de leur charge nette et de leurs interactions chimiques avec la phase stationnaire. Les composés séparés peuvent être visualisés à l'aide de différents types de révélateurs, tels que le bleu patenté, la lumière UV, les réactifs de coloration, etc. La chromatographie sur couche mince est une technique simple, rapide et économique pour la séparation et l'identification de composés solides et de mélanges.
4. La Chromatographie ionique (CI) : utilisée pour les ions dissous dans les solutions, tels que les sels, les acides, les alcalis. En CI, les ions sont séparés en fonction de leur affinité chimique avec la phase stationnaire, souvent une résine chargée, et leur différence de charge nette. La phase mobile, souvent une solution tampon dans un milieu basique, permet l'élution des ions séparés de la colonne chromatographique. Les composés séparés sont détectés à la sortie de la colonne en utilisant différents types de détecteurs, tels que les détecteurs de conductivité, les détecteurs UV, etc. La chromatographie ionique est une technique de séparation hautement sélective et sensible pour les ions dissous dans les solutions.
5. La Chromatographie d'exclusion stérique (CES) : utilisée en biologie et en chimie pour séparer les molécules de grande taille, telles que les protéines, les polymères, les enzymes, les peptides, les acides nucléiques et d'autres macromolécules. Elle est également utilisée pour déterminer la distribution de poids moléculaire d'un polymère. Dans la SEC, une colonne chromatographique est remplie de résines chargées, généralement des billes de gel de polymère poreux ou de la cellulose avec des pores de tailles différentes. Les molécules de grande taille sont exclues de la pénétration dans les pores et sont ainsi retardées par la colonne chromatographique, tandis que les molécules de petite taille pénètrent dans les pores et sont plus rapidement éluées. Les molécules sont ainsi séparées en fonction de leur taille.  Les avantages de la CES comprennent une haute résolution, une sensibilité élevée, une large plage de poids moléculaire et une faible quantité d'échantillon requise.

Il est important de noter que chaque technique de séparation a ses propres avantages et inconvénients en termes de résolution, de sensibilité, de rapidité, de coût, etc.